0 30 Views

ПЦР

ПЦР – способ увеличения количества копий ДНК, находящейся в биологическом материале в минимальных количествах.

Этапы:

1) денатурация ДНК (до 90°)

2) добавление специфического праймера и охлаждение ДНК (до 55°) (отжиг)

3) добавление нуклеотидов (субстратов синтеза) и ДНК-полимеразы (фермента синтеза)

4) повторение цикла.

Позволяет за короткое время получить множество копий ДНК (порядка 20 млн за 0,5 ч).

Применение:

1) диагностика вирусных и бактериальных инфекций (ВИЧ, гепатит, хламидиоз, туберкулеза, менингита)

2) генетическая диагностика заболеваний

3) судебная медицина.

4) изучение генома человека

Клонирование – получение большого количества молекул, клеток, организмов – потомков одного предка, Отдельных генов.

Вектор – природный ген определенного микроорганизма с внедренным в него участком чужеродного гена.

Рестриктазы (рестриктационные эндонуклеазы) – ферменты, узнающие специфическую последовательность нуклеотидов и разрывающие в этом месте молекулу ДНК. Действуют в области Палиндромов ДНК – мест, где последовательность нуклеотидов одной цепи идентична последовательности нуклеотидов другой цепи, прочитанной в обратном порядке. В молекулярной биологии рестриктазы используют для создания генетических векторов (внедрение гена в плазмиду и т. п.).

В качестве векторов применяется: 1) плазмида – небольшая кольцевидная молекула ДНК бактерий, реплицируемая независимо от нуклеоида 2) бактериофаг лямбда 3) хромосомы дрожжей 4) космидные векторы — гибрид фага лямбда и плазмиды.

Этапы клонирования:

1) получение генетического материала (разрезание рестриктазами вектора и внедряемого гена с образованием палиндромов)

2) включение гена в векторную молекулу с помощью лигаз и создание рекомбинантной ДНК

3) введение рекДНК в кл хозяина

4) отбор трансформированных кл на селективных средах.

Применение:

1) получение разнообразных вакцин и иммунологических диагностикумов

2) синтез ряда БАВ: СТГ, инсулин, эритропоэтин, интерфероны, факторы свертывания крови

3) получение ферментов в промышленности

4) получение относительно недорогого пищевого белка для животных и т. д.

Назад Витаминоподобные вещества
Вперёд Альгодисменорея: этиопатогенез, клиника, диагностика и лечение

Записи по теме

Биохимия (Билеты)

Липиды. Классификация липидов и их функции

Липиды — органические вещества, которые: 1) плохо растворимы или нерастворимы в воде, но растворяются в органических растворителях;2) являются настоящими или потенциальными эфирами жирных кислот; 3)усваиваются и используются живыми организмами. В

Биохимия (Билеты)

Роль инсулина в регуляции обмена углеводов, липидов и белков

Роль инсулина в регуляции обмена углеводов, липидов и белков: А) углеводы: ­ усвоение глюкозы (в мышцах и жировой ткани, но не мозге), ­ гликогенез Б) белки: ­ усвоение белка В)

Биохимия (Билеты)

Гормоны, регулирующие обмен кальция и фосфора

Гормоны, регулирующие обмен кальция и фосфора: А) паратирин — гормон паращитовидной железы – пептид. Механизм действия: 7-TMS р-р ® Gs-белок ® АЦ ® ­ цАМФ ® ПК А ® фосфорилирование

0 комментариев

Пока ответов нет

Ответить

Only registered users can comment.